(primo piano, sala 21)
Il dipinto fu realizzato a Genova per il duca Carlo Emanuele di Savoia e inviato poi a Torino, dove riscosse un discreto apprezzamento. Il soggiorno genovese fece conoscere a Gentileschi il brillante colorismo del fiammingo Van Dyck, fuso in quest'opera al classicismo rinascimentale toscano e al repertorio della pittura caravaggesca, con esiti di spettacolare raffinatezza.
L'Annunciazione è considerata il capolavoro dell'artista e uno dei più grandi dipinti devozionali di ambito controriformato del XVII secolo. Di particolare rilevanza la tenda rossa drappeggiata sul fondo e la colomba dello spirito santo che entra dalla finestra.